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Elizabeth Fuentes Feria, Mar铆a Teresa Illnait.Zaragoz铆
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Evaluaci贸n de estuches de PCR-tiempo real para detecci贸n de virus del papiloma humano de alto riesgoIntroducci贸n: El empleo de t茅cnicas moleculares para el diagn贸stico de virus del papiloma humano de alto riesgo oncog茅nico (VPH-AR) es crucial para la detecci贸n precoz del c谩ncer cervicouterino. Objetivo: Evaluar el desempe帽o anal铆tico de dos estuches de PCR-tiempo real, comercializados por el Centro de Inmunoensayo de Cuba, para detectar VPH-AR. M茅todos: Se utilizaron dos paneles de ADN de muestras cervicouterinas: uno con 150 muestras, para validar el estuche SUMASIGNAL HPV 16/18, el proceso de extracci贸n de ADN y su utilidad como prueba cuantitativa, y otro con 163 muestras para evaluar el estuche HPV 13+2. Se determin贸 la utilidad cl铆nica del estuche HPV 13+2 en 55 muestras cervicovaginales autocolectadas. Se calcularon los indicadores de desempe帽o anal铆tico de ambos estuches con respecto a pruebas de referencia. Resultados: Los indicadores de desempe帽o para SUMASIGNAL HPV 16/18 fueron excelentes (> 95 %), concordancia 96 %, 铆ndice kappa=0,93 [0,85-1,01]. La extracci贸n de ADN mostr贸 100 % de especificidad cl铆nica y anal铆tica y 95 % de sensibilidad anal铆tica. Se obtuvo buena correlaci贸n con la prueba de referencia cuantitativa (r = + 0,688). El estuche HPV 13+2 tuvo especificidad y sensibilidad cl铆nicas del 100 %, la especificidad anal铆tica fue del 84 % debido a reactividad cruzada con otros VPH-AR. Su aplicaci贸n cl铆nica revel贸 alta frecuencia de infecci贸n (41,8 %): 23,6 % con VPH-AR, particularmente en mujeres j贸venes (50 %). La muestra autocolectada result贸 煤til (100 %). Conclusi贸n: Los ensayos evaluados mostraron altos est谩ndares de calidad, lo que permitir铆a su uso con una cobertura nacional en una plataforma tecnol贸gica disponible para todo el pa铆s.
Yudira Soto Brito, Yailen S谩nchez Dom铆nguez, Darien Ortega Le贸n, Vivian Kouri Cardell谩, Ariel Palenzuela D铆az, Licel de los 脕ngeles Rodr铆guez Lay, Yaim茅 Josefina Gonz谩lez Gonz谩lez, Celeste Ram铆rez Cardentey, Yoanna Ba帽os Morales
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Liena de Regla Ponce Rey, Maday Alonso del Rivero Antigua, Sonia Resik Aguirre
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Identificaci贸n de especies de Leishmania mediante PCR en tiempo real acoplada a curvas de fusi贸n de alta resoluci贸nIntroducci贸n: La leishmaniasis es una enfermedad causada por par谩sitos del g茅nero Leishmania. En Colombia se han informado 10 especies pat贸genas. El diagn贸stico parasitol贸gico tradicional basado en la observaci贸n de los par谩sitos no permite identificar la especie, por lo cual se deben emplear m茅todos moleculares, entre ellos la reacci贸n en cadena de la polimerasa o PCR convencional, pero esta presenta algunas limitaciones y requiere extensos periodos de tiempo para la obtenci贸n de resultados, que en ocasiones no son concluyentes. Objetivo: Evaluar un m茅todo basado en PCR en tiempo real acoplado a curva de temperatura de desnaturalizaci贸n media de alta resoluci贸n (PCR-HRM) que permita el diagn贸stico y la identificaci贸n simult谩nea de par谩sitos del g茅nero Leishmania en muestras cl铆nicas de humanos y en cultivos in vitro de manera sensible y espec铆fica. M茅todos: Se estandariz贸 una PCR-HRM, mediante la cual se evaluaron 237 muestras cl铆nicas, 98 clasificadas como positivas y 139 como negativas, parasitol贸gicamente por directo y/o cultivo. Las tipificaciones fueron comparadas con los resultados en paralelo obtenidos de una variante de la RCP, realizando cortes al amplicon que gener贸 un fragmento de restricci贸n de longitud polim贸rfica o PCR-RFLP que hab铆a sido previamente estandarizada. Resultados: Se logr贸 implementar una PCR-HRM para el diagn贸stico e identificaci贸n de especies de Leishmania, logrando un 100 % de concordancia con las tipificaciones obtenidas por PCR-RFLP. Incluso, se logr贸 detectar e identificar el par谩sito en muestras diagnosticadas como negativas por los m茅todos convencionales. Se encontr贸 que con un porcentaje de confiabilidad superior al 95 %, se lograron tipificar 91 muestras de 98; de estas el 81,63 % de los casos fueron L. panamensis, el 11,22% L. braziliensis e indeterminadas el 7,14 % de los casos. Conclusiones: La PCR-HRM es un buen m茅todo que permite la identificaci贸n de las especies m谩s prevalentes en Colombia, comparando temperaturas medias de desnaturalizaci贸n espec铆ficas seg煤n la especie de Leishmania involucrada.
Rafael Guillermo Villarreal Julio, Giovanny Herrera, Carlos Enrique Muskus L贸pez
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Frecuencia de infecci贸n por cestodos en el Laboratorio Nacional de Referencia de Parasitismo Intestinal-IPK, Cuba, 2010-2018Introduci贸n: Los cestodos son helmintos par谩sitos del humano y de animales, con complejos ciclos de vida. En las infecciones por los cestodos no existen programas de desparasitaci贸n masiva implementados para disminuir la carga parasitaria de estos a nivel mundial, dada la baja prevalencia que se informa en estudios epidemiol贸gicos. Existen pocos trabajos sobre la epidemiolog铆a y la detecci贸n de estas infecciones en la literatura internacional. Objetivo: Describir la frecuencia de infecci贸n de cestodos y sus caracter铆sticas epidemiol贸gicas. M茅todos: Estudio descriptivo y retrospectivo, realizado entre el 3 de enero de 2010 y 28 de diciembre de 2018. Se analizaron todas las muestras de heces, par谩sitos adultos y metacestodos enviadas de la red de Salud al Laboratorio Nacional de Referencia de Parasitismo Intestinal-IPK. El universo de estudio estuvo constituido por 9833 muestras, que fueron enviadas mayoritariamente de la provincia La Habana. Resultados: La infecci贸n por Inermicapsifer madagascariensis predomin贸 en ni帽os menores de 5 a帽os (69,6 %; IC 95 %: 47,1-86,8). La infecci贸n intestinal por Taenia spp. se diagnostic贸 prinipalmente en pacientes entre 15 y 65 a帽os de edad (88,2 %; IC95 %: 63,6-98,5). De los 47 casos positivos a la infecci贸n por cestodos, 24 pertenecieron al sexo femenino (51,1 %; IC95 %: 35,7-66,4) y 23 al sexo masculino (48,9 %; IC95 %: 33,6-64,3). No hubo diferencias significativas entre la infecci贸n por Inermicapsifer madagascariensis y Taenia spp. y el sexo de los pacientes (p藘 0,05). Conclusiones: Aunque la frecuencia de infecci贸n de las cestodiosis detectadas es baja, estos resultados pudieran ser 煤tiles para un control integrado de las principales cestodioisis en los diferentes grupos etarios.
Luis Enrique Jerez Puebla, Fidel 脕ngel N煤帽ez Fern谩dez, Ira铆s Virginia Atencio Mill谩n, Ra煤l Cordov铆 Prado, L谩zara Rojas Rivero, Yanet Fresco Sampedro, Laura Rodr铆guez Moreno, Marisol Mart铆nez Cruz, Anyelo B谩ez Garc铆a
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Rams茅s Alfaro Mora
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Leptospirosis humana una enfermedad no olvidada para Cuba. Investigaciones del Laboratorio Nacional de Referencia, durante el per铆odo 2018-2022Introducci贸n: En Cuba existe un Programa de Prevenci贸n y el Control para la leptospirosis. El laboratorio de referencia realiza investigaciones para fortalecer el diagn贸stico serol贸gico y molecular en casos y fallecidos cubanos que explora variables cl铆nico-epidemiol贸gicas y sociodemogr谩ficas. M茅todos: Se realizaron cuatro investigaciones (2018-2022) con muestras cl铆nicas, a las que se le aplicaron los m茅todos de SD Leptospira IgM-IgG, Leptospira ELISA-IgM, hemoaglutinaci贸n indirecta, microaglutinaci贸n con ant铆genos vivos, PCR a punto final y PCR Leptospira 16s RNA Real-TM de Sacace鈩. Se revisaron las solicitudes del diagn贸stico para operacionalizar las variables sociodemogr谩ficas y cl铆nico-epidemiol贸gicas. Se expresaron los resultados en frecuencias absolutas y porcentajes. Se organizaron dos ediciones del curso internacional de leptospirosis con programas dirigidos al fortalecimiento de la cl铆nica, la epidemiolog铆a y la microbiolog铆a de la enfermedad. Resultados: Las muestras de los fallecidos y pacientes graves con leptospirosis presentaron altos porcentajes de positividad (74,3 %, 79,7 %). Los m茅todos serol贸gicos confirmatorios fueron m谩s 煤tiles en muestras extra铆das antes del s茅ptimo d铆a (47 %), mientras que la PCR fue 煤til para el diagn贸stico temprano de la infecci贸n (32 %), sobre todo, en los pacientes serol贸gicamente negativos. Las variables sociodemogr谩ficas y cl铆nico-epidemiol贸gicas mostraron similitudes con lo descrito en la literatura de la enfermedad. La capacitaci贸n a 216 individuos increment贸 la preparaci贸n cient铆fica y t茅cnica para su desempe帽o profesional. Conclusi贸n: Los resultados demuestran la necesidad de sistematizar el diagn贸stico, as铆 como las estrategias de prevenci贸n y control de la leptospirosis en Cuba.
Ana Margarita Obreg贸n Fuentes, Eduardo Echevarr铆a P茅rez, Odisney Lugo Su谩rez, Liset Delgado Viera
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Odisney Lugo Su谩rez, Ana Margarita Obreg贸n Fuentes, Eduardo Echevarr铆a P茅rez, Yaindrys Rodr铆guez Olivera, Mar铆a Eugenia Toledo Roman铆, Alberto Baly Gil, Daleina Hern谩ndez Oliva
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Caracter铆sticas cl铆nico-epidemiol贸gicas de pacientes pedi谩tricos menores de un a帽o diagnosticados con COVID-19Introducci贸n: Los pacientes pedi谩tricos menores de un a帽o pueden enfermar por COVID-19; sin embargo, tienen menos riesgo de agravar que los adultos. Objetivo: Caracterizar desde el punto de vista cl铆nico-epidemiol贸gico a pacientes pedi谩tricos menores de un a帽o diagnosticados con COVID-19. M茅todos: Se realiz贸 un estudio observacional descriptivo en el Hospital Pedi谩trico de Camag眉ey durante el per铆odo de enero a diciembre de 2021. El universo y la muestra se constituy贸 por 700 pacientes pedi谩tricos que cumplieron con los criterios de selecci贸n. Las variables estudiadas fueron: grupo etario y sexo, municipio de residencia, mes del diagn贸stico, principales s铆ntomas y per铆odo transcurrido desde el inicio de los s铆ntomas hasta el diagn贸stico. Para el an谩lisis estad铆stico se utiliz贸 SPSS versi贸n 24.0 en una computadora Pentium V. La investigaci贸n se aprob贸 por el Consejo Cient铆fico y se tuvo en cuenta la Declaraci贸n de Helsinki. Resultados: Predominaron los lactantes entre 7 y 9 meses (28,9 %) del sexo masculino (53,7 %), procedentes del municipio Camag眉ey (42,2 %) y el municipio Esmeralda fue el de mayor incidencia (15,0 %). Se diagnostic贸 el n煤mero m谩s elevado de casos en el mes de agosto (30,1 %), mientras que la rinorrea (44,3 %) y la fiebre (32,3 %) fueron los s铆ntomas predominantes. El 85,4 % de los casos tuvo el diagn贸stico con 48 horas y menos de evoluci贸n. Conclusiones: La COVID-19 en pacientes menores de un a帽o afect贸 principalmente a los lactantes varones de entre siete y nueve meses de edad, que presentaron escasos y leves s铆ntomas cl铆nicos, con diagn贸stico oportuno y sin fallecidos.
Rolando Rodr铆guez Puga, Yasnier Due帽as Rodr铆guez, Yo谩nderson P茅rez D铆az, Roberto Danilo MacDonald Ruano
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Carlos Manuel Fern谩ndez Andreu, Gerardo Mart铆nez Mach铆n, Mayda Rosa Perurena Lancha, Mar铆a Teresa Illnait Zaragoz铆, Rosario Velar Mart铆nez, Javier Luis San Juan Gal谩n
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Rafael Guillermo Villarreal Julio, Enderson Murillo Ramos, Rene Ram铆rez Garc铆a, Ronald Guillermo Pel谩ez S谩nchez, Freddy Ruiz L贸pez, Luz Adriana Agudelo, Iv谩n Dar铆o V茅lez Bernal, Carlos Enrique Muskus L贸pez, Juan 脕lvaro L贸pez Quintero, Piedad Matilde Agudelo Fl贸rez
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Belsy Osoria Acosta Herrera, Alexander Pi帽贸n Ramos, Odalys Vald茅s Ram铆rez, Amely Arencibia Garcia, Clara Sav贸n Vald茅s, Suset Oropeza Fernandez, Mayra Mun茅 Jim茅nez, Grehete Gonzalez Mu帽oz, Angel Goyenechea Hernandez, Guelsys Gonzalez Baez, B谩rbara Hern谩ndez Espinosa, Luis Morier D铆az, Susana Borroto, Maria Josefa LLanes, Antonio Marrero
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L谩zara Rojas Rivera, Dora E. Ginorio Gavito, Fidel A. Nu帽ez Fern谩ndez, Mar铆a Isabel Valdespino, Nidelvys Hern谩ndez Castellanos, Mar铆a de Lourdes S谩nchez Alvarez, Vicente Montoto Mayor
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Leishmania y leishmaniasis. Veinte a帽os de estudio en el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour铆": aportes y perspectivasIntroducci贸n: la leishmaniasis es una enfermedad parasitaria causada por varias especies del g茅nero Leishmania, protozoo par谩sito que no circula en Cuba de forma aut贸ctona. Sin embargo, se presentan casos importados. Existen tres formas cl铆nicas principales y diversos m茅todos para realizar el diagn贸stico, que incluyen los parasitol贸gicos, serol贸gicos y m谩s recientemente, los moleculares. El tratamiento de elecci贸n son los antimoniales pentavalentes, los cuales presentan inconvenientes que han estimulado la b煤squeda de nuevas alternativas terap茅uticas. Objetivos: resumir los resultados de trabajo obtenidos en el estudio de Leishmania durante 20 a帽os y explicar las razones que motivaron la capacitaci贸n, entrenamiento e investigaci贸n de esta entidad en el Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour铆". M茅todos: se realiz贸 un estudio bibliom茅trico y se analizaron todos los resultados de trabajo del grupo de Leishmania del Instituto de Medicina Tropical "Pedro Kour铆" durante 20 a帽os. Se consultaron todas las publicaciones realizadas en el grupo y se determinaron los resultados fundamentales en las principales l铆neas de investigaci贸n. Resultados: se describen los aportes m谩s importantes en 谩reas de investigaci贸n como la inmunizaci贸n con ADN, el diagn贸stico molecular y la b煤squeda de nuevas alternativas terap茅uticas, y se remite al lector a consultar las publicaciones que contienen los detalles de cada estudio. Se mencionan las colaboraciones principales con centros nacionales y extranjeros. Se comentan las perspectivas futuras del trabajo del grupo de investigaci贸n. Conclusiones: el grupo ha acometido l铆neas de investigaci贸n de inter茅s y es responsable del mayor aporte del pa铆s en el campo de investigaci贸n de este par谩sito, en correspondencia con su misi贸n. La continuidad de la investigaci贸n, contribuir a la soluci贸n de algunos de los problemas a煤n no resueltos de esta parasitosis y la aplicaci贸n de los resultados obtenidos, ser谩 un reto para los pr贸ximos a帽os.
Ana Margarita Montalvo 脕lvarez, Lianet Monzote Fidalgo
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Maiyel Alfonso Garc铆ia, Eneida Rodr铆guez Casa, Bioquis P茅rez Manso
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Majela Garc铆a Montero, Nibaldo Luis Gonz谩lez Sosa, Humberto Franco Villavicencio, Gloria Greite Jim茅nez Alfonso
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Comisi贸n de diagn贸stico de casos sospechosos de tuberculosis con baciloscopia negativa: aceptabilidad del servicio por los m茅dicos presentadoresIntroducci贸n: en etapa de eliminaci贸n de la tuberculosis, resulta de gran inter茅s la identificaci贸n temprana de estos enfermos en cualquiera de sus formas, incluyendo aquellos con manifestaciones cl铆nicas-radiol贸gicas y microscop铆a negativa. Objetivos: conocer la frecuencia con que los m茅dicos de diferentes servicios de salud presentan los expedientes cl铆nicos de enfermos sospechosos de tuberculosis en la Comisi贸n de Diagn贸stico de enfermos de Tuberculosis con Baciloscopias Negativas (CODIBAARNE) del Hospital Neumol贸gico Ben茅fico Jur铆dico de La Habana, la procedencia de dichos facultativos y sus opiniones sobre este servicio cient铆fico-t茅cnico. M茅todos: estudio descriptivo exploratorio. Para precisar la procedencia de los m茅dicos presentadores, se aplic贸 un 煤nico formulario de encuesta. Resultados: en el 2004-05 se encuestaron 181 m茅dicos y en el 2011, 40. De los primeros 181 encuestados, 118 (65,2 %) proced铆an de 44 policl铆nicos de la atenci贸n primaria de salud y 63 (34,8 %) de 17 hospitales de atenci贸n secundaria. Del primer grupo, 142 (78,5 %) consideraron bueno y 煤til el servicio cient铆fico-t茅cnico y 34 (19 %) expresaron que era instructivo y aprend铆an con el servicio brindado. Del segundo grupo, 33 (82,5 %) son M茅dicos Generales Integrales, y expresaron opiniones muy similares a las del primer grupo entrevistado. Conclusi贸n : CODIBAARNE brinda extensa cobertura de servicios cient铆fico-t茅cnicos a m茅dicos de atenci贸n primaria y secundaria, que suscitan opiniones muy favorables de la gran mayor铆a de sus usuarios, consider谩ndola como una herramienta complementaria para el diagn贸stico de la tuberculosis con baciloscopia negativa.
Mariana Peralta P茅rez, Lellanis Arroyo Rojas, Delfina Machado Molina, Sara M. Marfil Iniesta, Yaxsier de Armas Rodr铆guez, Aleida Valladares Baena, Gilda Ferrer Rivera, Luisa Armas P茅rez
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Nuevas herramientas para el diagn贸stico de la tuberculosisIntroducci贸n: en las 煤ltimas d茅cadas se han desarrollado nuevas herramientas para disminuir el tiempo de diagn贸stico de las infecciones por Mycobacterium tuberculosis. Objetivo: introducir nuevas herramientas para la identificaci贸n de M. tuberculosis y comparar los resultados con el cultivo en L枚wenstein Jensen. M茅todos: se estudiaron 1 368 muestras recibidas en el Laboratorio Nacional de Referencia de Tuberculosis del Instituto de Medicina Tropical 鈥淧edro Kour铆鈥, de agosto 2010 - agosto 2014. Las muestras despu茅s de procesadas fueron inoculadas en paralelo en L枚wenstein Jensen y en BacT ALERT. Los resultados se ana颅lizaron y compararon con relaci贸n al total de aislamientos, tiempo de detecci贸n de crecimiento y tasa de contaminaci贸n, se calcularon adem谩s los indicadores de desempe帽o del BacT ALERT. Resultados: por Bact/ ALERT se identific贸 Mycobacterium tuberculosis en 126 (98,5 %) muestras y 116 (88,5 %) por el L枚wenstein Jensen. El tiempo de detecci贸n de crecimiento de Mycobacterium tuberculosis por el BacT/ ALERT fue de 16,6 d铆as, dos veces menor que el obtenido por el L枚wenstein Jensen (35,5 d铆as). La tasa de contaminaci贸n por el Bact/ ALERT y L枚wenstein Jensen fue de 11 % y 7,8 %, respectivamente. La sensibilidad, especificidad e 铆ndice de Youden fue de 99,1 %, 99,0 % y 0,98, respectivamente; y el 铆ndice de validez del 99 %. Conclusiones: el sistema Bact/ ALERT result贸 un m茅todo 煤til porque acort贸 significativamente el tiempo de diagn贸stico de la tuberculosis permitiendo comenzar el tratamiento de forma oportuna, sobre todo en pacientes con baciloscopia negativa. El uso combinado del L枚wenstein Jensen y medio l铆quido asegur贸 la recuperaci贸n del total de cepas de M. tuberculosis.
Mar铆a Rosarys Mart铆nez Romero, Misleidis Sardi帽a Arag贸n, Grechen Garc铆a Le贸n, Lilian Mar铆a Mederos Cuervo, Ra煤l D铆az Rodr铆guez
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Ana Margarita Montalvo, Jorge Fraga, Lisandra 脕lvarez, Annia Alba, Cecia Torres
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Amparo Olga D铆az Castrillo, Digna Ramos Molina, Reina Susana Zarut Cruz, Luisa Armas P茅rez, Edilberto Gonz谩lez Ochoa
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Ana Margarita Montalvo Alvarez, Orestes Blanco Gonz谩lez, Virginia Cap贸 de Paz, Jorge Fraga Nodarse, Lianet Monzote Fidalgo
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M茅todo de reacci贸n en cadena de la polimerasa para determinar la replicaci贸n del virus de la hepatitis BObjetivo: evaluar el desempe帽o cl铆nico de un m茅todo de reacci贸n en cadena de la polimerasa con modificaciones para la detecci贸n de la replicaci贸n del virus de la hepatitis B en pacientes infectados. M茅todos: se estudiaron 266 muestras de suero de pacientes provenientes de los servicios de Gastroenterolog铆a, Trasplante, Hemodi谩lisis y Hematolog铆a del Hospital Cl铆nicoquir煤rgico "Hermanos Ameijeiras", con el ant铆geno de superficie (HBsAg) positivo y altos valores de enzimas hep谩ticas (aspartatoaminotransferasa, aspartatoaminotransglutaminasa y ganmaglutamiltrasferasa), as铆 como 5 muestras de individuos cl铆nicamente sanos. El ADN se extrajo mediante el m茅todo del fenol-cloroformo. Se amplific贸 un fragmento de la regi贸n Pre S del virus de la hepatitis B y un fragmento del gen de la 脽-globina como control interno de la reacci贸n. Resultados: El fragmento del gen de la 脽-globina se verific贸 en las 266 muestras estudiadas. La regi贸n Pre S del virus de la hepatitis B en cambio, fue detectada en 103 de ellas, siendo informadas como positivas para la replicaci贸n viral. En la muestra se obtuvo una prevalencia 98,15 % para la replicaci贸n del virus de la hepatitis B. La especificidad cl铆nica del ensayo fue del 100 %, la sensibilidad cl铆nica del 38 %, el valor predictivo positivo del 100 % y el valor predictivo negativo del 64 %. El an谩lisis de concordancia no mostr贸 acuerdo (魏= 0,022 para una p= 0,07) entre las enzimas hep谩ticas y la reacci贸n en cadena de la polimerasa. Los ensayos de repetitividad y de reproducibilidad mostraron que los resultados son reproducibles. El mayor porcentaje de positividad se encontr贸 en los pacientes remitidos por el Servicio de Hematolog铆a (66,7 %). Conclusiones: el m茅todo de reacci贸n en cadena de la polimerasa evaluado constituye una herramienta certera para el monitoreo de la replicaci贸n del virus de la hepatitis B. Contar con su implementaci贸n y aplicaci贸n en la instituci贸n que se efetu贸 el estudio reviste gran importancia para el sistema de salud del pa铆s.
Maria Teresa Mart铆nez Echevarr铆a, Suchiquil Rangel Velazquez, Gissel Garc铆a Men茅ndez, Amarylis Mart铆nez Piedra, Pedro E. Velbes Marquetti, Ra煤l Pablo Ferreira Capote
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Garc铆a Nazar茅 Pembele, Filomena da Silva, Carolina Ferreira Miguel, Pedro Rafael Dimbu, Filomeno Fortes, L谩zara Rojas Rivero
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Ana Margarita Obregon Fuentes
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Ernesto Monroy Vaca, Gerardo Mart铆nez Mach铆n, Carlos Fern谩ndez Andreu, Mar铆a Teresa Illnait Zaragoz铆, Aiyal茅n Garc铆a Rodr铆guez, Mayda Perurena Lancha, Ra煤l D铆az Rodr铆guez
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