Evaluación preliminar de la actividad de Ageratina havanensis contra dengue virus 2

Introducción: El dengue es la enfermedad viral transmitida por mosquitos de más rápida propagación en el mundo. A pesar de la alta incidencia de la enfermedad no existe tratamiento antiviral efectivo ni vacuna aprobada para su uso contra esta infección. La planta Ageratina havanensis ha sido ampliamente utilizada por nuestra cultura popular y en otros países debido a sus diversas propiedades biológicas.

Objetivo: Evaluar la actividad antiviral de cuatro extractos provenientes de Ageratina havanensis y dos flavonoides aislados de dicha planta frente al virus dengue 2.

Métodos: La pesquisa primaria de actividad antiviral de cada extracto y flavonoide se realizó mediante el ensayo de detección de la productividad vírica, y se evaluó la acción virucida de los extractos etanólico de tallo y butanólico de hoja.

Resultados: Todos los extractos inhibieron la replicaci√≥n viral al evidenciarse disminuci√≥n del n√ļmero de placas de lisis, sin embargo, no se evidenci√≥ disminuci√≥n del t√≠tulo infectivo viral en el ensayo virucida. El tratamiento con la sakuranetina mostr√≥ valores de inhibici√≥n de la productividad viral entre 61-91 %, y para la 7-metoxiaromadendrina se registraron valores de reducci√≥n viral entre 64-86 %.

Conclusiones: Los extractos y flavonoides aislados de Ageratina havanensis mostraron acción antiviral. Los extractos etanólico de tallo y butanólico de hojas no poseen acción virucida sobre la cepa viral empleada. El presente trabajo constituye el primer informe respecto a la evaluación de extractos y compuestos aislados de A. havanensis frente al virus dengue.

Gloria del Carmen del Barrio Alonso, Yenisey Jardines Figueredo, Iraida Spengler Salabarr√≠a, Trina Haydee Garc√≠a P√©rez, Annelle Roque Quintero, Mayling √Ālvarez Vera
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Evaluación preliminar de la actividad antiviral de Ageratina havanensis frente al virus dengue-2 utilizando ensayos inmunoenzimáticos

Introducción: Se presenta la evaluación preliminar de la actividad antiviral de extractos de Ageratina havanensis (etanólico de tallo, AH-T-EtOH; butanólico de hoja, AH-H-ButOH y acetato de etilo de hoja, AH-H-AcEtO) utilizando dos sistemas inmunoenzimáticos, un ELISA celular (ELISAc) y la técnica de inmunoperoxidasa. Objetivo: Evaluar la actividad antiviral de los extractos de Ageratina havanensis utilizando dos sistemas inmunoenzimáticos.

Métodos: Se normalizó y empleó un ELISAc y la técnica de inmunoperoxidasa en evaluar de forma preliminar la actividad antiviral de tres extractos de Ageratina havanensis a diferentes concentraciones y tiempos de adición mediante la detección de la expresión de la proteína E del virus dengue.

Resultados: El ELISAc logr√≥ como par√°metros √≥ptimos: l√≠nea celular Vero, ant√≠geno viral en cultivo de c√©lulas, tiempo de expresi√≥n de la prote√≠na E de 96 h, compuesto fijador metanol-acetona y bloqueador leche descremada al 1 %. La menor expresi√≥n de la prote√≠na E (mayor inhibici√≥n sobre la replicaci√≥n viral), fue al adicionar el extracto AH-T-EtOH a su mayor concentraci√≥n y 1 h antes de inocular el virus dengue-2 cepa A15 (VDEN-2 A15). El extracto AH-H-ButOH a concentraciones de 125 ¬Ķg/mL y 250 ¬Ķg/mL present√≥ una ligera limitaci√≥n de expresi√≥n de E 1 h despu√©s de la inoculaci√≥n viral. El extracto AH-H-AcEtO a las concentraciones empleadas, no mostr√≥ difererencia a√Īadido antes y despu√©s de la inoculaci√≥n. El ensayo de inmunoperoxidasa exhibi√≥ resultados an√°logos para los extractos.

Conclusiones: La mayor inhibici√≥n de la replicaci√≥n viral fue obtenida con el extracto AH-H-ButOH, a su mayor concentraci√≥n y ambos tiempos de adici√≥n. Los ensayos inmunoenzim√°ticos aplicados son herramientas √ļtiles para evaluar extractos de Ageratina havanensis con posible actividad antiviral.

Maritza Pupo Ant√ļnez, Dailyn Medero D√≠az, Susana V√°zquez Ramudo, Luis Francisco Morier D√≠az, Mayling √Ālvarez Vera, Gloria del Barrio Alonso
 
Metodología de pesquisa primaria de actividad antidengue a partir de productos naturales

Introducci√≥n: El virus dengue, transmitido por mosquitos del g√©nero Aedes ha reemergido en los √ļltimos a√Īos produciendo la enfermedad transmitida por artr√≥podos con mayor prevalencia en humanos, y no existe una terapia antiviral espec√≠fica ni vacunas, para su tratamiento y prevenci√≥n. Ello ha motivado la b√ļsqueda de productos y compuestos naturales con actividad antiviral, lo cual trae consigo la necesidad de establecer un sistema de evaluaci√≥n de productos naturales y sint√©ticos mediante una metodolog√≠a de pesquisa r√°pida in vitro.

Objetivo: Proponer un sistema de pesquisa primaria de actividad antiviral contra el virus dengue basado en células.

Métodos: Se utilizaron como fuentes primarias de información trabajos publicados en revistas nacionales e internacionales registradas en las bases de datos SciELO o PubMed. Los ejemplos seleccionados en las figuras y tabla proceden de las publicaciones conjuntas del Grupo de Virología de la Facultad de Biología de la Universidad de La Habana y del Laboratorio de Arbovirus del Instituto de Medicina Tropical Pedro Kourí.

Informaci√≥n, an√°lisis y s√≠ntesis: Se presentan las principales metodolog√≠as basadas en c√©lulas, y se enfatiza en aquellas asumidas por nuestro grupo (evaluaci√≥n de la citotoxicidad y el ensayo primario de actividad antiviral). Se muestra el algoritmo de evaluaci√≥n de un producto. La metodolog√≠a descrita ha permitido poner en marcha un programa de b√ļsqueda de f√°rmacos antidengue, teniendo en cuenta los criterios de la evaluaci√≥n de la eficacia antiviral y la toxicidad, para realizar un estudio posterior de mecanismo de acci√≥n de los diferentes compuestos o productos evaluados.

Gloria Del Carmen Del Barrio Alonso, Mayling Alvarez Vera
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Evaluación de la actividad antiviral del alga parda Sargassum fluitans frente a Echovirus 9

I

Introducci√≥n: Echovirus 9 es un enterovirus humano de alta prevalencia que ocasiona graves enfermedades sist√©micas como la meningitis as√©ptica y en menor medida mortalidad infantil. No existe tratamiento antiviral o vacunaci√≥n para este virus, como ocurre con la mayor√≠a de los enterovirus. Las algas del g√©nero Sargassum constituyen una fuente promisoria de compuestos con actividad antiviral, lo cual motiva la b√ļsqueda de nuevos f√°rmacos contra estos virus.
Objetivo: evaluar la actividad antiviral in vitro de un extracto hidroalcohólico del alga parda Sargassum fluitans frente a Echovirus 9.
M√©todos: se realiz√≥ la determinaci√≥n cualitativa de los tipos de metabolitos secundarios (tamizaje fitoqu√≠mico) presentes en el extracto seg√ļn la t√©cnica de Rondina y Coussio, 1969. Se evalu√≥ la citotoxicidad del extracto en la l√≠nea celular Vero mediante el m√©todo del MTT y se calcul√≥ la CC50 mediante an√°lisis de regresi√≥n lineal. El c√°lculo de la actividad antiviral (CE50) se realiz√≥ mediante la inhibici√≥n del efecto citop√°tico en c√©lulas Vero. Se determin√≥ el √≠ndice selectivo (IS)= CC50/EC50.
Resultados: el tamizaje fitoqu√≠mico mostr√≥ la presencia de quinonas, proantocianidinas, catequinas, triterpenos polares, taninos hidrolizables, az√ļcares reductores, az√ļcares no reductores y prote√≠nas. El extracto no fue citot√≥xico a las concentraciones evaluadas e inhibi√≥ de forma potente la replicaci√≥n de Echovirus 9 en la l√≠nea celular empleada con un elevado IS (95,05).
Conclusiones: el extracto hidroalcohólico de S. fluitans posee actividad antiviral in vitro frente a Echovirus 9. Este es el primer informe de actividad antiviral de esta especie frente a enterovirus.

Liena de Regla Ponce Rey, Gloria del Carmen del Barrio Alonso, Iraida Spengler Salabarría, Sonia Resik Aguirre, Annele Roque Quintero
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Actividad antiviral de un extracto acuoso del alga roja Laurencia obtusa frente a virus influenza A y B

Introducci√≥n: la terapia antiviral frente a las infecciones provocadas por virus influenza se basa en empleo de inhibidores de las prote√≠nas M2 y neuraminidasa (NA). Sin embargo, la emergencia de cepas estacionales resistentes a ambos grupos de f√°rmacos motiva la b√ļsqueda de nuevos f√°rmacos anti-influenza. Los extractos de algas pueden ser utilizados como fuente para la obtenci√≥n de estos compuestos, teniendo en cuenta la diversidad de metabolitos descrita en estos organismos.
Objetivo: evaluar la actividad antiviral in vitro de un extracto acuoso del alga roja Laurencia obtusa frente a virus influenza A (H1N1), A (H3N2) e influenza B.
Métodos: se evaluó la citotoxicidad en células MDCK, mediante cálculo de la viabilidad celular, en presencia de concentraciones crecientes del extracto. Los efectos sobre la replicación viral se cuantificaron mediante determinación de los niveles de la hemaglutinina (HA) y de la inhibición del efecto citopático (ECP). El índice selectivo (IS) se calculó a partir de la relación IS=CC50/CE 50.
Resultados: el extracto acuoso de Laurencia obtusa posee actividad antiviral in vitro frente a virus influenza B, A (H3N2) y A (H1N1) con valores de IS de 7,73; 11,79 y 12,95; respectivamente.
Conclusiones: Laurencia obtusa inhibe la replicación de virus influenza de elevada importancia clínica. La realización de ensayos secundarios de caracterización de la actividad biológica, así como de caracterización molecular del extracto, podrían permitir el desarrollo de novedosos compuestos antivirales. Este trabajo constituye el primer informe de actividad inhibitoria de esta especie de macroalga frente a virus influenza.

Amilcar P√©rez-Riverol, Alexander Pi√Ī√≥n Ramos, Luis Francisco Morier D√≠az, Yuneysi Torres L√≥pez, Dianeya Mendoza Llanes, Gloria del Barrio Alonso
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