Métodos fenotípicos y moleculares para la identificación de Candida dubliniensis
Palabras clave:
Candida dubliniensis; candidiasis bucal; VIH-sida; reacción en cadena de la polimerasa, identificación fenotípica.Resumen
Introducción: Las especies del género Candida pueden causar un amplio espectro de manifestaciones clínicas; aunque Candida albicans continúa siendo la de mayor relevancia, otras especies se aíslan cada vez con mayor frecuencia. Entre estas últimas, se conoce que Candida dubliniensis tiene una estrecha relación filogenética con la primera y puede desarrollar resistencia a los azoles, por lo que resulta imprescindible su correcta identificación. Aunque se han utilizado diversos métodos fenotípicos, son las técnicas moleculares las que definen su diagnóstico.
Objetivos: Identificar aislados clínicos del complejo Candida albicans, pertenecientes a la colección de hongos patógenos del Laboratorio Nacional de Referencia de Micología del Instituto de Medicina Tropical “Pedro Kourí” y establecer un algoritmo de trabajo que permita la diferenciación entre Candida albicans y Candida dubliniensis.
Métodos: Se reidentificaron 45 casos aislados presuntamente identificados como Candida albicans, procedentes de lesiones bucales de pacientes con VIH-sida. Se evaluaron diez métodos fenotípicos y se aplicó la reacción en cadena de la polimerasa que identifica los genes ITS1 e ITS2 del ARNr y el gen que codifica para la topoisomerasa II de Candida.
Resultados: La filamentación y producción de clamidosporas, el crecimiento en agar tabaco con Tween 80, la actividad enzimática y el desarrollo en agar Sabouraud trifeniltetrazolio permitieron la identificación presuntiva de cuatro aislados de Candida dubliniensis, lo cual se confirmó mediante la técnica molecular utilizada. Con estas herramientas se estableció un algoritmo en el laboratorio para la diferenciación de ambas especies.
Conclusiones: Los hechos ratifican la necesidad de combinar métodos fenotípicos y genotípicos para lograr una diferenciación concluyente entre Candida albicans y Candida dubliniensis.
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